Diferencias en la fagocitosis de Mycobacterium habana TMC 5135 en cultivos celulares de macrófagos murinos / Differences in phagocytosis of Mycobacterium ´habana´ TMC 5135 by murine macrophages cellular cultures

La tuberculosis es uno de los mayores problemas que enfrenta la salud mundial en la actualidad. La única vacuna disponible contra esta enfermedad es la BCG, esta protege solo contra la tuberculosis grave de la infancia, lo cual plantea un reto en la búsqueda de nuevos candidatos vacunales. Teniendo en cuenta el antecedente protector de Mycobacterium ´habana´ contra la tuberculosis experimental, nos propusimos aportar elementos que avalen el empleo de M. ´habana´ TMC 5135 como candidato vacunal contra la tuberculosis, mediante estudios de infección en cultivos celulares de macrófagos murinos. Se caracterizó el proceso de fagocitosis de esta micobacteria por cultivos primarios de macrófagos peritoneales murinos y por la línea celular RAW 264.7, para lo cual se determinó el porcentaje de fagocitosis y el número fagocítico. El presente trabajo demostró que el proceso de fagocitosis de M. ´habana´ TMC 5135 está influenciado por la fuente celular empleada como célula hospedadora, así como por la carga bacteriana infectante y el tiempo de exposición a la misma. La presente investigación contribuye a la caracterización de la infección por esta micobacteria en sus principales células blanco de la inmunidad innata y traza el camino de futuras investigaciones para evaluar la activación de mecanismos efectores de la inmunidad innata frente a este candidato(AU)

Tuberculosis remains as a major problem in the global health. BCG is the available vaccine against tuberculosis but only protects against severe form of disease during childhood, so the search for new vaccine candidates is a challenge. Taking into account the protective capacity of Mycobacterium ´habana´ against experimental tuberculosis, we proposed in vitro experiments using murine macrophages (peritoneal macrophages and cell line Raw 264.7) to characterize phagocytic process of this candidate. Phagocitic index and phagocytic number were calculated. The present work demonstrated that the phagocytosis process of M. ‘habana’ TMC 5135 is influenced by the cellular source used as host cell, as well as by the infecting bacterial load and the time of exposure. The present investigation contributes to the characterization of the infection by this mycobacteria in its main target cells of innate immunity and it suggest future investigations to evaluate the activation of effector mechanisms of the innate immunity against this candidate(AU)

Diferencias en la fagocitosis de Mycobacterium habana TMC 5135 en cultivos celulares de macrófagos murinos / Differences in phagocytosis of Mycobacterium ´habana´ TMC 5135 by murine macrophages cellular cultures

La tuberculosis es uno de los mayores problemas que enfrenta la salud mundial en la actualidad. La única vacuna disponible contra esta enfermedad es la BCG, esta protege solo contra la tuberculosis grave de la infancia, lo cual plantea un reto en la búsqueda de nuevos candidatos vacunales. Teniendo en cuenta el antecedente protector de Mycobacterium habana contra la tuberculosis experimental, nos propusimos aportar elementos que avalen el empleo de M. habana TMC 5135 como candidato vacunal contra la tuberculosis, mediante estudios de infección en cultivos celulares de macrófagos murinos. Se caracterizó el proceso de fagocitosis de esta micobacteria por cultivos primarios de macrófagos peritoneales murinos y por la línea celular RAW 264.7, para lo cual se determinó el porcentaje de fagocitosis y el número fagocítico. El presente trabajo demostró que el proceso de fagocitosis de M. habana TMC 5135 está influenciado por la fuente celular empleada como célula hospedadora, así como por la carga bacteriana infectante y el tiempo de exposición a la misma. La presente investigación contribuye a la caracterización de la infección por esta micobacteria en sus principales células blanco de la inmunidad innata y traza el camino de futuras investigaciones para evaluar la activación de mecanismos efectores de la inmunidad innata frente a este candidato(AU)

Tuberculosis remains as a major problem in the global health. BCG is the available vaccine against tuberculosis but only protects against severe form of disease during childhood, so the search for new vaccine candidates is a challenge. Taking into account the protective capacity of Mycobacterium ´habana´ against experimental tuberculosis, we proposed in vitro experiments using murine macrophages (peritoneal macrophages and cell line Raw 264.7) to characterize phagocytic process of this candidate. Phagocitic index and phagocytic number were calculated. The present work demonstrated that the phagocytosis process of M. habana TMC 5135 is influenced by the cellular source used as host cell, as well as by the infecting bacterial load and the time of exposure. The present investigation contributes to the characterization of the infection by this mycobacteria in its main target cells of innate immunity and it suggest future investigations to evaluate the activation of effector mechanisms of the innate immunity against this candidate(AU)

Producción in vitro de interferón gamma en ratones vacunados con ´Mycobacterium habana´ frente a antígenos de Mycobacterium tuberculosis / In vitro interferon gamma production in mice vaccinated with ´Mycobacterium habana´ against Mycobacterium tuberculosis antigens

Introducción: el desarrollo de nuevas vacunas antituberculosas requiere de la caracterización de la respuesta de inmunidad celular, inducida por el nuevo candidato vacunal frente a los antígenos principales de Mycobacterium tuberculosis. Objetivo: determinar el potencial inmunogénico de ´Mycobacterium habana´ TMC-5135, cuando se usa como vacuna subcutánea en ratones Balb/c. Métodos: en este estudio se inocularon subcutáneamente ratones Balb/c con la cepa viva ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 y se determinó la producción in vitro de IFN gamma en cultivos celulares de pulmón, bazo y ganglios inguinales estimulados con antígenos solubles totales y el antígeno 85b. Como grupo control se vacunaron ratones con BCG subcepa Phipps. Resultados: particularmente en los ganglios linfáticos inguinales, ambos antígenos indujeron mayor producción de IFN gamma en los ratones vacunados con ´Mycobacterium habana´que con BCG. Conclusiones: los resultados justifican la realización de nuevas investigaciones usando ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 como candidato vacunal para prevenir la tuberculosis.

Introduction: development of new antituberculosis vaccines requires the characterization of the cell-mediated immune responses induced by mycobacterial antigens. Objective: to determine the immunogenic potential of ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 when using subcutaneous vaccine in Balb/c mice. Methods: in this study, Balb/c mice were inoculated subcutaneously with live ´Mycobacterium habana´ TMC-5135. The production of IFN gamma in cell suspensions obtained from the lungs, the spleen and the lymph nodes after stimulation with mycobacterial antigens Ag85b or culture filtrate antigens (CFA) was recorded. Results: the production of IFN gamma after stimulation with CFA and Ag85b was higher in mice vaccinated with ´M. habana´ than in animals immunized with BCG. Conclusions: these results encourage new research on ´M. habana´ as vaccinal candidate against tuberculosis.

Producción in vitro de interferón gamma en ratones vacunados con Mycobacterium habana frente a antígenos de Mycobacterium tuberculosis / In vitro interferon gamma production in mice vaccinated with ´Mycobacterium habana´ against Mycobacterium tuberculosis antigens

Introducción: el desarrollo de nuevas vacunas antituberculosas requiere de la caracterización de la respuesta de inmunidad celular, inducida por el nuevo candidato vacunal frente a los antígenos principales de Mycobacterium tuberculosis. Objetivo: determinar el potencial inmunogénico de ´Mycobacterium habana´ TMC-5135, cuando se usa como vacuna subcutánea en ratones Balb/c. Métodos: en este estudio se inocularon subcutáneamente ratones Balb/c con la cepa viva Mycobacterium habana TMC-5135 y se determinó la producción in vitro de IFN gamma en cultivos celulares de pulmón, bazo y ganglios inguinales estimulados con antígenos solubles totales y el antígeno 85b. Como grupo control se vacunaron ratones con BCG subcepa Phipps. Resultados: particularmente en los ganglios linfáticos inguinales, ambos antígenos indujeron mayor producción de IFN gamma en los ratones vacunados con ´Mycobacterium habana´que con BCG. Conclusiones: los resultados justifican la realización de nuevas investigaciones usando ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 como candidato vacunal para prevenir la tuberculosis(AU)

Introduction: development of new antituberculosis vaccines requires the characterization of the cell-mediated immune responses induced by mycobacterial antigens. Objective: to determine the immunogenic potential of Mycobacterium habana TMC-5135 when using subcutaneous vaccine in Balb/c mice. Methods: in this study, Balb/c mice were inoculated subcutaneously with live ´Mycobacterium habana´ TMC-5135. The production of IFN gamma in cell suspensions obtained from the lungs, the spleen and the lymph nodes after stimulation with mycobacterial antigens Ag85b or culture filtrate antigens (CFA) was recorded. Results: the production of IFN gamma after stimulation with CFA and Ag85b was higher in mice vaccinated with ´M. habana´ than in animals immunized with BCG. Conclusions: these results encourage new research on ´M. habana´ as vaccinal candidate against tuberculosis(AU)

[In vitro interferon gamma production in mice vaccinated with 'Mycobacterium habana' against Mycobacterium tuberculosis antigens]. / Producción in vitro de interferón gamma en ratones vacunados con 'Mycobacterium habana' frente a antígenos de Mycobacterium tuberculosis.

INTRODUCTION: development of new antituberculosis vaccines requires the characterization of the cell-mediated immune responses induced by mycobacterial antigens. OBJECTIVE: to determine the immunogenic potential of 'Mycobacterium habana' TMC-5135 when using subcutaneous vaccine in Balb/c mice. METHODS: in this study, Balb/c mice were inoculated subcutaneously with live 'Mycobacterium habana' TMC-5135. The production of IFN gamma in cell suspensions obtained from the lungs, the spleen and the lymph nodes after stimulation with mycobacterial antigens Ag85b or culture filtrate antigens (CFA) was recorded. RESULTS: the production of IFN gamma after stimulation with CFA and Ag85b was higher in mice vaccinated with 'M. habana' than in animals immunized with BCG. CONCLUSIONS: these results encourage new research on 'M. habana' as vaccinal candidate against tuberculosis.

El Laboratorio Nacional de Referencia y su contribución a la eliminación de la tuberculosis en Cuba / The National Laboratory of Reference and its contribution to the elimination of tuberculosis in Cuba

Se describe la participación del Laboratorio Nacional de Referencia e Investigaciones en Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí, en la organización del recurso bacteriológico para el diagnóstico y la búsqueda de casos, fundamentalmente en la atención primaria de salud, en apoyo al Programa Nacional de Control de la Tuberculosis. Se hace referencia a las funciones y principales actividades científicas de este Laboratorio Nacional, Centro Colaborador OPS/OMS, como cabecera de los laboratorios de la red de diagnóstico de la tuberculosis en el país. La introducción y aplicación de nuevas tecnologías de avanzada permite contar con valiosas herramientas para dar respuesta a los diferentes retos que plantean la tuberculosis y las micobacteriosis en la actualidad. Con la ejecución de un proyecto del fondo mundial de lucha contra el sida, la tuberculosis y la malaria, se ha fortalecido la red de diagnóstico, lo que debe contribuir, en un futuro cercano, a la eliminación de la tuberculosis como problema de salud en Cuba

The participation of the National Laboratory of Reference and Research on Tuberculosis and Mycobacteria of Pedro Kouri Institute of Tropical Medicine in the organization of the bacteriological resources for the diagnosis and screening of cases in the primary health care, in support of the national program for control of tuberculosis, was described in this paper. Reference was made to the functions and main scientific activities of this laboratory, which is a PAHO/WHO collaborating center at the forefront of the tuberculosis diagnosis laboratory network in the country. The introduction and the implementation of state-of-the-art technologies have allowed valuable tools to be used to meet several challenges posed by tuberculosis and mycobacteria nowadays. Thanks to the implementation of a World Fund against AIDS, tuberculosis and malaria project, the diagnosis network has strengthened, which must contribute to the elimination of tuberculosis as a health problem in Cuba in the near future

El Laboratorio Nacional de Referencia y su contribución a la eliminación de la tuberculosis en Cuba / The National Laboratory of Reference and its contribution to the elimination of tuberculosis in Cuba

Se describe la participación del Laboratorio Nacional de Referencia e Investigaciones en Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí, en la organización del recurso bacteriológico para el diagnóstico y la búsqueda de casos, fundamentalmente en la atención primaria de salud, en apoyo al Programa Nacional de Control de la Tuberculosis. Se hace referencia a las funciones y principales actividades científicas de este Laboratorio Nacional, Centro Colaborador OPS/OMS, como cabecera de los laboratorios de la red de diagnóstico de la tuberculosis en el país. La introducción y aplicación de nuevas tecnologías de avanzada permite contar con valiosas herramientas para dar respuesta a los diferentes retos que plantean la tuberculosis y las micobacteriosis en la actualidad. Con la ejecución de un proyecto del fondo mundial de lucha contra el sida, la tuberculosis y la malaria, se ha fortalecido la red de diagnóstico, lo que debe contribuir, en un futuro cercano, a la eliminación de la tuberculosis como problema de salud en Cuba(AU)

The participation of the National Laboratory of Reference and Research on Tuberculosis and Mycobacteria of Pedro Kouri Institute of Tropical Medicine in the organization of the bacteriological resources for the diagnosis and screening of cases in the primary health care, in support of the national program for control of tuberculosis, was described in this paper. Reference was made to the functions and main scientific activities of this laboratory, which is a PAHO/WHO collaborating center at the forefront of the tuberculosis diagnosis laboratory network in the country. The introduction and the implementation of state-of-the-art technologies have allowed valuable tools to be used to meet several challenges posed by tuberculosis and mycobacteria nowadays. Thanks to the implementation of a World Fund against AIDS, tuberculosis and malaria project, the diagnosis network has strengthened, which must contribute to the elimination of tuberculosis as a health problem in Cuba in the near future(AU)

Efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 en la infección experimental por Cryptococcus neoformans / Effect of 4B3 monoclonal antibody on the experimental Cryptococcus neoformans infection

Introducción: las frecuencias de recaídas y elevada letalidad de la criptococosis se mantienen altas, lo cual incentiva la búsqueda de nuevas estrategias terapéuticas. Objetivos: evaluar el efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 sobre la infección criptocócica en ratones BALB/c. Métodos: se determinó la cinética de la concentración sérica del anticuerpo monoclonal para su administración intraperitoneal (500 µg), que fue medida por ELISA cuantitativo de doble anticuerpo. La capacidad protectora se observó mediante el registro de supervivencia de ratones BALB/c administrados con 500 µg de anticuerpo monoclonal 4B3 e inoculados con 2 x 10(2,2) células/mL de Cryptococcus neoformans, así como por evaluación de la diseminación de la levadura a los principales órganos diana. Se identificó el efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 sobre la fagocitosis y lisis del microorganismo por células de la línea de macrófagos P338.D1. Resultados: la dosis empleada fue suficiente para mantener valores séricos elevados del 4B3 (38 µg/mL) durante al menos 46 d. Se determinó que el 4B3 no confiere protección, lo cual potencia la diseminación del microorganismo y disminuye el tiempo de vida de los animales. El ensayo de fagocitosis mostró que el anticuerpo evaluado incrementa la actividad fagocítica de los macrófagos sin lograr un efecto fungicida. Conclusiones: el anticuerpo monoclonal 4B3 estimula la fagocitosis de C. neoformans por macrófagos, pero sin efecto fungicida. Con ello favorece la diseminación de la levadura y disminuye el tiempo de vida de los ratones a la infección.

Introduction: frequent relapses and high lethality of criptococcosis has encouraged the search for new therapeutic strategies. Objectives: to evaluate the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the cryptococcal infection in Balb/c mice. Methods: the kinetics in serum concentration of the studied monoclonal antibody was determined for intraperitoneal administration (500 µg) by quantitative sandwich ELISA. In order to assess its protective capability, were administered 500 µg of 4B3 and innoculated 2 x 10(2.2) cells/mL of Cryptococcus neoformans. The survival of mice was recorded and the yeast dissemination to the main target organs was evaluated. Macrophages P338.D1 cell lines were used to measure the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the phagocytosis and lysis of the microorganism. Results: the used dose helped to keep high values (38 µg/m) of 4B3 in serum for at least 46 days. It was found that the monoclonal antibody does not give protection, which makes the microorganism dissemination possible, along with the reduction in the survival of mice. Finally, the phagocytosis test showed that 4B3 increased the phagocytic activity of macrophages without any fungicidal effect. Conclusions: the monoclonal antibody 4B3 stimulates C. neoformans phagocytosis by macrophages without fungicidal effect, thus favoring yeast dissemination and decreasing the survival of mice due to cryptococcal infection.

Efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 en la infección experimental por Cryptococcus neoformans / Effect of 4B3 monoclonal antibody on the experimental Cryptococcus neoformans infection

Introducción: las frecuencias de recaídas y elevada letalidad de la criptococosis se mantienen altas, lo cual incentiva la búsqueda de nuevas estrategias terapéuticas. Objetivos: evaluar el efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 sobre la infección criptocócica en ratones BALB/c. Métodos: se determinó la cinética de la concentración sérica del anticuerpo monoclonal para su administración intraperitoneal (500 Ág), que fue medida por ELISA cuantitativo de doble anticuerpo. La capacidad protectora se observó mediante el registro de supervivencia de ratones BALB/c administrados con 500 Ág de anticuerpo monoclonal 4B3 e inoculados con 2 x 10(2,2) células/mL de Cryptococcus neoformans, así como por evaluación de la diseminación de la levadura a los principales órganos diana. Se identificó el efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 sobre la fagocitosis y lisis del microorganismo por células de la línea de macrófagos P338.D1. Resultados: la dosis empleada fue suficiente para mantener valores séricos elevados del 4B3 (38 Ág/mL) durante al menos 46 d. Se determinó que el 4B3 no confiere protección, lo cual potencia la diseminación del microorganismo y disminuye el tiempo de vida de los animales. El ensayo de fagocitosis mostró que el anticuerpo evaluado incrementa la actividad fagocítica de los macrófagos sin lograr un efecto fungicida. Conclusiones: el anticuerpo monoclonal 4B3 estimula la fagocitosis de C. neoformans por macrófagos, pero sin efecto fungicida. Con ello favorece la diseminación de la levadura y disminuye el tiempo de vida de los ratones a la infección(AU)

Introduction: frequent relapses and high lethality of criptococcosis has encouraged the search for new therapeutic strategies. Objectives: to evaluate the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the cryptococcal infection in Balb/c mice. Methods: the kinetics in serum concentration of the studied monoclonal antibody was determined for intraperitoneal administration (500 Ág) by quantitative sandwich ELISA. In order to assess its protective capability, were administered 500 Ág of 4B3 and innoculated 2 x 10(2.2) cells/mL of Cryptococcus neoformans. The survival of mice was recorded and the yeast dissemination to the main target organs was evaluated. Macrophages P338.D1 cell lines were used to measure the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the phagocytosis and lysis of the microorganism. Results: the used dose helped to keep high values (38 Ág/m) of 4B3 in serum for at least 46 days. It was found that the monoclonal antibody does not give protection, which makes the microorganism dissemination possible, along with the reduction in the survival of mice. Finally, the phagocytosis test showed that 4B3 increased the phagocytic activity of macrophages without any fungicidal effect. Conclusions: the monoclonal antibody 4B3 stimulates C. neoformans phagocytosis by macrophages without fungicidal effect, thus favoring yeast dissemination and decreasing the survival of mice due to cryptococcal infection(AU)

[Effect of 4B3 monoclonal antibody on the experimental Cryptococcus neoformans infection]. / Efecto del anticuerpo monoclonal 4B3 en la infección experimental por Cryptococcus neoformans.

INTRODUCTION: frequent relapses and high lethality of criptococcosis has encouraged the search for new therapeutic strategies. OBJECTIVES: to evaluate the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the cryptococcal infection in Balb/c mice. METHODS: the kinetics in serum concentration of the studied monoclonal antibody was determined for intraperitoneal administration (500 microg) by quantitative sandwich ELISA. In order to assess its protective capability, were administered 500 microg of 4B3 and innoculated 2 x 10(22) cells/mL of Cryptococcus neoformans. The survival of mice was recorded and the yeast dissemination to the main target organs was evaluated. Macrophages P338.D1 cell lines were used to measure the effect of the monoclonal antibody 4B3 on the phagocytosis and lysis of the microorganism. RESULTS: the used dose helped to keep high values (38 microg/m) of 4B3 in serum for at least 46 days. It was found that the monoclonal antibody does not give protection, which makes the microorganism dissemination possible, along with the reduction in the survival of mice. Finally, the phagocytosis test showed that 4B3 increased the phagocytic activity of macrophages without any fungicidal effect. CONCLUSIONS: the monoclonal antibody 4B3 stimulates C. neoformans phagocytosis by macrophages without fungicidal effect, thus favoring yeast dissemination and decreasing the survival of mice due to cryptococcal infection

Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var. neoformans / Obtention of specific antisera for the serotyping of Cryptococcus neoformans var. neoformans

Se propuso la obtención de antisueros en el Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical ôPedro Kouríö, que permitiera la rápida identificación de las variedades y serotipos de Cryptococcus neoformans, dada la importancia clínico-epidemiológica que reviste su conocimiento. Mediante la inmunización de conejos con células enteras formalinizadas de los 4 serotipos de esta levadura, se obtuvieron antisueros que fueron adsorbidos con células de los serotipos heterólogos; lográndose 3 antisueros capaces de diferenciar a la var. neoformans (anti AD) y a sus respectivos serotipos (anti-A y anti-D). Este trabajo contribuirá al conocimiento de la epidemiología de esta importante enfermedad en el medio cubano, por ser la primera vez en Cuba que se logra la obtención de antisueros útiles para la identificación de los serotipos pertenecientes a la variedad neoformans, principal agente causal de la criptococosis

Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var. neoformans / Obtention of specific antisera for the serotyping of Cryptococcus neoformans var. neoformans

Se propuso la obtención de antisueros en el Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, que permitiera la rápida identificación de las variedades y serotipos de Cryptococcus neoformans, dada la importancia clínico-epidemiológica que reviste su conocimiento. Mediante la inmunización de conejos con células enteras formalinizadas de los 4 serotipos de esta levadura, se obtuvieron antisueros que fueron adsorbidos con células de los serotipos heterólogos; lográndose 3 antisueros capaces de diferenciar a la var. neoformans (anti AD) y a sus respectivos serotipos (anti-A y anti-D). Este trabajo contribuirá al conocimiento de la epidemiología de esta importante enfermedad en el medio cubano, por ser la primera vez en Cuba que se logra la obtención de antisueros útiles para la identificación de los serotipos pertenecientes a la variedad neoformans, principal agente causal de la criptococosis(AU)

Utilidad de la D-prolina en la diferenciación de las variedades de Cryptococcus neoformans / Usefulness of D-proline in the differentiation of varieties of Cryptococcus neoformans

Se realizó un estudio comparativo entre la asimilación de la D-prolina y el crecimiento en medio canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) utilizados para la clasificación de las variedades de Cryptococcus neoformans. En las 86 cepas estudiadas, 100 por ciento de coincidencia entre ambos métodos, permitió afirmar que 95,34 por ciento pertenecían a la var. neoformans y el resto (4,65 por ciento) a la var. gattii. Los resultados obtenidos corroboraronn que todos los aislamientos clínicos autóctonos, hasta el presente, corresponden a la var. neoformans y permitieron sugerir el uso de la D-prolina para la evaluación inicial de las cepas, como un método alternativo y sencillo que presentó, en estas condiciones, alta coincidencia con el método de referencia (crecimiento en CGB)

Utilidad de la D-prolina en la diferenciación de las variedades de Cryptococcus neoformans / Usefulness of D-proline in the differentiation of varieties of Cryptococcus neoformans

Se realizó un estudio comparativo entre la asimilación de la D-prolina y el crecimiento en medio canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) utilizados para la clasificación de las variedades de Cryptococcus neoformans. En las 86 cepas estudiadas, 100 por ciento de coincidencia entre ambos métodos, permitió afirmar que 95,34 por ciento pertenecían a la var. neoformans y el resto (4,65 por ciento) a la var. gattii. Los resultados obtenidos corroboraronn que todos los aislamientos clínicos autóctonos, hasta el presente, corresponden a la var. neoformans y permitieron sugerir el uso de la D-prolina para la evaluación inicial de las cepas, como un método alternativo y sencillo que presentó, en estas condiciones, alta coincidencia con el método de referencia (crecimiento en CGB)(AU)

[Obtention of specific antisera for the serotyping of Cryptococcus neoformans var. neoformans]. / Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var. neoformans.

The obtention of antisera at the Mycology Laboratory of "Pedro Kouri" Institute of Tropical Medicine was proposed to allow the rapid identification of the varieties and serotypes of Cryptococcus neoformans, since it is very important from the clinico-epidemiological point of view to know them. By immunizing rabbits with formalized whole cells of the 4 serotypes of this yeast, it was possible to obtain antisera that were absorbed with cells of the heterologous serotypes. 3 antisera capable of differentiating the neoformans var. (anti AD) and its respective serotypes (anti-A and anti-D) were attained. This paper will contribute to the knowledge of the epidemiology of this important disease in the Cuban setting for being the first time that useful antisera are obtained in Cuba to identify the serotypes corrresponding to the neoformans variety, which is the main causal agent of criptococcosis.

[Usefulness of D-proline in the differentiation of varieties of Cryptococcus neoformans]. / Utilidad de la D-prolina en la diferenciación de las variedades de Cryptococcus neoformans.

A comparative study was conducted between the assimilation of D-proline and the growth on canavanine-glycine-bromothymol blue (CGB) medium used for the classification of the varieties of Cryptococcus neoformans. In the 86 studied strains, 100% of coincidence between both methods allowed to affirm that 95.34% corresponded to the neoformans var. and the rest (4.65%) to the gattii var. The results obtained corroborated that all the autoctonous clinical isolations up to the present correspond to the. neoformans var. and made possible to suggest the use of D-proline for the initial evaluation of strains, as an alternative and simple method that presented under these conditions high coincidence with the reference method (growth in CGB).

Pigmentación de cepas de Cryptococcus neoformans sobre agar semilla de girasol / Pigmentation of strains from Cryptococcus neoformans on sunflower seed agar

Se determinó la producción de melanina sobre el medio agar extracto de semilla de girasol de 86 cepas de Cryptococcus neoformans, pertenecientes al Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical ôPedro Kouríö; de estas, 54,7 por ciento produjo colonias con pigmento carmelita intenso, 5,8 por ciento un pigmento claro y 37,2 por ciento una tonalidad intermedia. Se creó un cuarto grupo para aquellas cepas que presentaron un pigmento verdínico (2,3 por ciento). Con este trabajo se contribuyó de forma importante a una mejor caracterización de las cepas pertenecientes a la colección de la institución y sirve de base a estudios posteriores de patogenicidad y susceptibilidad

Pigmentación de cepas de Cryptococcus neoformans sobre agar semilla de girasol / Pigmentation of strains from Cryptococcus neoformans on sunflower seed agar

Se determinó la producción de melanina sobre el medio agar extracto de semilla de girasol de 86 cepas de Cryptococcus neoformans, pertenecientes al Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”; de estas, 54,7 por ciento produjo colonias con pigmento carmelita intenso, 5,8 por ciento un pigmento claro y 37,2 por ciento una tonalidad intermedia. Se creó un cuarto grupo para aquellas cepas que presentaron un pigmento verdínico (2,3 por ciento). Con este trabajo se contribuyó de forma importante a una mejor caracterización de las cepas pertenecientes a la colección de la institución y sirve de base a estudios posteriores de patogenicidad y susceptibilidad(AU)